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生科伊成器课题组实现新型RNA修饰mSUP6SUPAm甲基转移酶的鉴定

发布者:admin
日期:2019-07-14 14:35

生科伊成器课题组实现新型RNA修饰mSUP6SUPAm甲基转移酶的鉴定

2018年11月28日,北京大学生命科学学院伊成器研究员课题组在CellResearch在线发表了题为“Cap-specific,terminalN6-methylationbyamammalianm6Ammethyltransferase”的研究论文(DOI:/s41422-018-0117-4)。

该文章鉴定了N6,2-O-二甲基腺嘌呤(m6Am)的修饰酶——PCIF1,为进一步研究该动态、可逆修饰的生物学功能提供了新的思路。 RNA上存在一百多种化学修饰,其中N6-甲基腺嘌呤(m6A)作为真核生物mRNA上含量最普遍的化学修饰,参与调控了很多重要的生物学过程。 不同于m6A,m6Am主要位于真核生物mRNA5端帽子之后的第一个碱基。

早在1975年,科学家就鉴定到了m6Am的存在。 最近的研究发现m6Am也是一个动态、可逆的修饰,但其修饰酶一直未被鉴定,极大地限制了对m6Am功能机制的研究。

为了鉴定该修饰酶,伊成器课题组从全细胞裂解液中通过生化手段分离并鉴定了m6Am的修饰酶,并通过体内和体外实验,证实了PCIF1的甲基转移酶活性:通过LC-MS/MS定量质谱发现PCIF1敲低细胞系中mRNA的m6Am修饰水平显著下降,通过体外生化实验表明PCIF1对带有m7G帽子结构的RNA具有最高的修饰活性。 除此之外,研究还发现PCIF1在不同物种中保守性很高,证实了小鼠PCIF1蛋白同样具有很高的甲基化活性,从而提示该甲基化酶在高等生物中具有重要作用。

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